13個月發證：一種抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法、裝置及應用（廣東省中醫院）

一、發明專利案件基本信息

技術領域：生物醫藥及醫療技術

專利號：CN202110391652.2  

專利名稱：一種抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法、裝置及應用

專利申請日： 2021-04-13

專利授權日： 2022-05-27

專利申請人：廣東省中醫院(廣州中醫藥大學第二附屬醫院、廣州中醫藥大學第二臨床醫學院、廣東省中醫藥科學院）

發明人：陳前軍，張玉柱，梁倩怡，劉曉媛，羅天裕，李華超，張宏艷，盧海，李東梅，許銳，任黎萍

專利代理機構：廣州高炬知識產權代理有限公司

專利代理師：孫明科

二、發明證書

三、發明專利申請文件信息

申請文件：19頁，9.9萬字，附圖12

授權權利要求：9，其中獨立權利要求：2

權項結構樹：

 

四、合享發明專利價值度評分

五、發明內容摘要：

本發明公開了一種抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法、裝置及應用，該方法包括如下步驟：將小鼠置于束縛裝置內，使其不能動作，每天束縛4小時、維持12小時的光?暗循環，共持續3周或以上時間，構建得到具有抑郁障礙相關表型的自發乳腺癌轉基因小鼠抑郁障礙動物模型。本發明還公開了其束縛裝置，將該動物模型用作模擬人類乳腺癌與抑郁癥過程、及篩選診療藥物或療法。本發明構建的動物模型，具有重復性好、個體差異小、建模時間短、動物死亡率低等優點，可廣泛應用于模擬人類抑郁癥誘發乳腺癌及相關疾病病理和診療物質的篩選與療效驗證。

六、發明摘要附圖：

本發明自發乳腺癌小鼠11周乳腺組織HE染色結果照片

七、獨立權利要求2項：

1 .一種抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，其特征在于，其包括如下步驟：

（1）培育5周齡、MMTV?PyMT轉基因自發乳腺癌的小鼠，作為實驗動物，并將其分為對照組、造模組兩組；

（2） 制備使小鼠發生抑郁癥的束縛裝置；

（3）將造模組小鼠在設定的障礙條件下飼養：將每只小鼠獨立裝入到一個室內束縛裝置內，通過機械方式使其身體壓迫在束縛裝置內、不能扭頭轉身、不能動作，每天束縛4小時，維持12小時的光?暗循環，共持續3周或以上時間，使其罹患抑郁癥；

對照組小鼠在野外自由環境下飼養、不被束縛，兩組其他飼養條件均一致；

（4）分別對造模組與對照組小鼠，進行動物行為和生理組織檢測，是否具備抑郁障礙相關表型；如造模組小鼠具有抑郁障礙相關表型，則得到抑郁癥誘發乳腺癌的動物模型。

7 .一種采用權利要求1～6之一所述方法構建的抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的應用，其特征在于，將該模型用于檢測乳腺癌與抑郁癥之間發病及病變過程的關聯性實驗。

八、本發明主要的有益效果：

1）本發明提供抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，采用MMTV-PyMT轉基因小鼠為實驗動物，采用機械束縛裝置使其逐步罹患抑郁癥，結合其自發乳腺癌轉基因，可以較好的實現模擬人類的抑郁癥誘發乳腺癌病理發生與發展進程的過程。其構建的動物模型，具有性能穩定、可重復性好、操作便捷、動物個體差異小、造模時間短、動物死亡率低等優點。在實際操作中，實驗動物的應激較小，傷害較小，可以減少外傷對動物模擬發病過程的影響。

2）本發明提供抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，采用的MMTV-PyMT轉基因FVB小鼠為原發性動物模型，可模擬原發性乳腺癌發病過程，其采用特定的剝離MMTV病毒，導致小鼠乳腺腫瘤的重要病毒的組織特異啟動子和增強子，來介導PyMT癌基因在乳腺中高表達，從而誘發乳腺上皮細胞中PyMT基因的表達失控，進而誘發細胞的惡性增殖，導致乳腺癌的發生；其模擬效益優于移植性動物模型。同時，FVB小鼠容易焦慮，其自身不容易自發產生腫瘤。因此，適合于作為本發明抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建。

3）本發明提供抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，通過實驗動物的選擇與實驗裝置的結合，構建周期短，經測試3周后實驗動物的行為學即發生明顯改變，可以加快實驗過程、縮短實驗周期。

4）本發明提供抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，其構建的自發乳腺癌轉基因小鼠抑郁癥模型，可以廣泛用于模擬人類抑郁障礙對乳腺腫瘤發生機制的影響，同時該動物模型，構建過程穩定的、可重復、操作便捷，并且可較好的模擬人乳腺癌與抑郁癥相互影響下病理的發生與發展進程。

八、發明人團隊簡介

本發明由廣東省中醫院乳腺科主任醫師陳前軍教授團隊研發完成。陳前軍教授，教授，主任醫師，醫學博士，博士研究生導師。廣東省中醫院乳腺大科主任，廣東省“杰出青年醫學人才”，中華中醫藥學會乳腺病分會主任委員，世界中醫藥學會聯合會乳腺病專業委員會副會長，廣東省中醫藥學會乳腺病專業委員會主任委員，廣州中醫藥大學中醫外科學學術帶頭人，中華中醫藥學會乳腺病分會主任委員，中國臨床腫瘤學會（CSCO）乳腺癌專委會委員，中國抗癌協會（CBCS）乳腺癌專委會委員，廣東省醫學會外科分會乳腺學組副組長。該團隊包括張玉柱博士、碩士等多名專家級研究人員，具有豐富的臨床實踐及研發經驗。

廣東省中醫院（廣州中醫藥大學第二附屬醫院、廣州中醫藥大學第二臨床醫學院、廣東省中醫藥科學院、廣東省中醫藥研修院），是三級甲等醫院，始建于1933年，是我國近代史上最早的中醫醫院之一，被譽為“南粵杏林第一家”，是國家中醫臨床研究基地建設單位，以及廣東省首批高水平醫院建設單位。該醫院是全國規模最大的中醫醫院，連續8年蟬聯全國中醫醫院競爭力排行榜榜首。2021年門診服務患者684萬人次、住院患者超15萬人次。

九、本案專利代理師經驗分享

   

抑郁癥（也稱抑郁障礙）是一種廣泛的慢性醫學疾病，可能會影響思想，情緒和身體健康。其特點是情緒持續低落、煩躁不安、動機受損等，從精神動作障礙到認知障礙不等。抑郁還與嚴重的身體健康合并癥有關，包括心血管疾病、代謝風險因素，如肥胖、過早死亡，對社會造成巨大的經濟損失。抑郁癥的治療和預防仍然是公共衛生的優先事項。

乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤，是全球三大最常見的癌癥之一，女性一生中患上乳腺癌的概率高達8%-10%，嚴重威脅了現代女性的健康。乳腺癌小鼠模型是研究乳腺癌疾病發生機理和藥效學評價中的重要工具。一般乳腺癌小鼠模型主要分為移植瘤和原發性瘤。原發性乳腺癌模型保留有正常乳腺組織中的各類細胞和精細結構,擁有癌細胞發生和生長的微環境，這種高度的還原性使原發性乳腺癌模型無論在組織學，還是在病理學方面都擁有比移植瘤更高的擬真性，因此，原發性的乳腺癌小鼠模型成為乳腺癌發生和轉移機理的理想模型。

然而，由于存在多種技術困難，目前尚缺乏一種可模擬抑郁癥誘發乳腺腫瘤機制的動物模型，同時，由于目前對抑郁障礙研究所使用的動物模型存在操作復雜、可重復性差、個體差異大、造模時間長、動物死亡率高等缺點，無法將其直接應用于模擬誘發乳腺癌的動物模型。因此，本領域迫切需要開發一種穩定的、可重復的、操作便捷的、可模擬人類抑郁癥誘發乳腺癌病理發生與發展進程的動物模型。

針對這一情況，本發明人團隊研發了一種抑郁癥誘發乳腺癌動物模型的構建方法，通過操作簡便、可重復性強的建模方法，對試驗動物進行機械限制、使其罹患抑郁癥并結合自發乳腺癌，用來模擬研究人類的抑郁癥誘發乳腺癌的相關表征和機理；本發明還提供了一種實施該方法的束縛裝置，該裝置結構緊湊、易于使用；同時，本發明還進一步提供了該動物模型在醫療領域的應用。

本專利涉及多個學科和技術領域，包括疾病醫療技術、生理病理分析、生物醫藥研發篩選、動物模型、物理器械及效果驗證等技術，對專利代理師的跨領域的專業能力、綜合水平，對醫療診斷、生物醫藥及動物模型技術領域的經驗要求較高。我公司派出專利代理師孫明科與研發團隊對接，多次到訪研發團隊研發場所，進行面對面演示、講解和交流。經過反復多次與研發團隊深入交流，共同分析技術問題和發明要點，在深度檢索和多次撰寫修改的基礎上，完成了本項發明專利的申請文件。本案專利代理師通過與研發團隊成員密切溝通，認真聽取發明人的構思和技術方案，并且進行了深入的技術挖掘，準確縮短技術問題和技術效果，從而得到了本發明呈現的較為完善的技術方案。

本案件由于涉及疾病性狀、發病機理模擬及動物建模、醫藥開發及篩選技術，屬于生物醫藥技術領域，具有較大的社會意義，專利代理師在提交、審查意見答復、繳費等多個環節均做了快速處理，最終使本發明按照正常審查流程，能夠使本發明在13個月的時間頒發了發明證書，為發明人團隊盡早實施該專利技術創造了良好的條件。

   本專利是專利代理師與發明人團隊密切合作完成的跨領域高質量專利申請案件，雙方多次、反復討論、修改了多稿才最終定稿，發明人科研團隊及代理師對本發明均付出了辛苦的勞動。

本發明專利作為生物醫藥領域的高質量的發明專利，與申請人布局的其他發明專利相互配合，對建模方法、建模器械、醫學應用等進行了合理分層、遞進式的保護，采用快速的申請和審查答復，大幅縮短了審查時間。本發明專利快速獲得授權后，有利于該申請人對該專利技術成果進行轉化、實施，盡早投入使用，造福廣大患者，產生更好的社會和經濟效益。